小鼠腎炎模型誘導(dǎo)方案

小鼠腎炎模型誘導(dǎo)方案

免疫復(fù)合物腎小球腎炎（IGGN）模型簡介：

腎小球腎炎是指一系列由免疫應(yīng)答介導(dǎo)的導(dǎo)致腎小球炎癥。膜性腎病和膜性腎小球腎炎是人類腎病綜合征最常見的病因。膜性腎病的特征是由免疫復(fù)合物沿著基底膜與內(nèi)皮細(xì)胞之間的間隙沉積，導(dǎo)致基底膜增厚激活補(bǔ)體。激活的炎癥級聯(lián)導(dǎo)致腎功能受損，包括蛋白尿和腎功能衰竭。有研究報道用大鼠膜性腎病模型（Heymann腎炎），研究人膜性腎病，盡管Heymann腎炎覆蓋了人膜性腎炎的很多方面，但是使用大鼠作模型有很多缺點(diǎn)。小鼠膜性腎炎模型是研究膜性腎病發(fā)病機(jī)制和開發(fā)靶向治療的重要研究工具。Wayne et al.等研究用cBSA可誘導(dǎo)兔膜性腎病癥狀。另外，已有研究用cBSA在狗、貓、兔等動物成功誘導(dǎo)免疫復(fù)合物腎小球腎炎模型。Chen et al,將這一模型用于小鼠，稱為：免疫復(fù)合物腎小球腎炎（IGGN）模型。

人的膜性腎病是由免疫復(fù)合物沿著基底膜與內(nèi)皮細(xì)胞之間的間隙沉積而引起的。沉積的免疫復(fù)合物激活補(bǔ)體，導(dǎo)致基底膜變厚。對于小鼠ICGN模型，用cBSA反復(fù)免疫小鼠。帶正電荷的cBSA與帶負(fù)電荷的基底膜（GBM）結(jié)合。抗cBSA抗體（主要是IgG1）與cBSA產(chǎn)生的免疫復(fù)合物，導(dǎo)致人膜性腎病出現(xiàn)多種癥狀，如：基底膜增厚，低蛋白血癥和蛋白尿。這種發(fā)病機(jī)制，同樣適用在兒童膜性腎病。

操作流程：

動物品系：

Balb/c and ICR小鼠（≥7-8周齡，雄性或雌性都可以）,C57BL/6小鼠不能誘導(dǎo)產(chǎn)生該模型。

乳劑制備：

用cBSA和CFA弗氏佐劑（cat#7008, 1mg/ml）等體積混合

注意：

制備乳劑后請檢測乳劑質(zhì)量，滴一滴到水中不擴(kuò)散，說明乳劑質(zhì)量良好，反之，重新混勻，直到為油包水狀態(tài)。

免疫方法

小鼠尾根部皮下免疫100ul乳劑（cBSA 0.1mg）

腎炎誘導(dǎo)

2周后，靜脈注射200ul(400ug) cBSA(2 mg/ml)，每隔一天重復(fù)免疫，一共免疫5次。

注意

靜脈注射cBSA，導(dǎo)致小鼠過敏反應(yīng)，有可能會導(dǎo)致小鼠死亡。為了避免這種情況發(fā)生，初次免疫劑量要小一些（50-100ug cBSA）,在隨后的2-5次免疫逐漸增加劑量到400ug。

腎炎評估：

通過檢測小鼠16小時尿中尿蛋白含量評價腎炎嚴(yán)重程度。推薦使用chondrex 公司小鼠白蛋白檢測試劑盒（cat#3012）

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