三維（3D）凝膠制備方法

更新時間：2024-08-12

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三維（3D）凝膠制備方法

背景簡介：

膠原蛋白是脊椎動物體內豐富的蛋白質，存在于皮膚、軟骨、骨、椎間盤、血管、肌腱、韌帶和角膜中，是細胞外基質（ECM）的主要成分。I型膠原由兩條相同的α1鏈和一條不同的α2鏈（1）組成，形成稱為原膠原的三螺旋結構。這種三螺旋構象增加了組織的結構強度和抗酶降解能力，在形成細胞外基質過程中起著關鍵作用。

膠原蛋白有助于促進組織再生和/或靶向藥物釋放，因為它具有低抗原性，低毒、高水溶性、高生物降解性。I型膠原結合整合素，促進細胞遷移、附著以及增殖和分化。盡管通過胃蛋白酶消化從原膠原中去除N-和C-末端原膠原被廣泛用于工業用途，但原膠原作為含有交聯末端肽的天然膠原支架可能是有益的。

Chondrex公司提供酸性I型原膠原溶液，可用于傳統的二維（2D）系統以及三維（3D）凝膠中的支架，用于模擬成纖維細胞和軟骨細胞中的細胞生長。

品牌	Chondrex
貨號	1203
產品名稱	可溶性I型膠原
應用	用于傳統的二維（2D）系統以及三維（3D）凝膠中的支架，用于模擬成纖維細胞和軟骨細胞中的細胞生長。
規格	4 mg/ml x 12.5 ml (sterile filtered)
形態	溶于0.01M HCL
來源	豬
內毒素	＜1 EU/ml
純度	＞95% I 膠原
保存	4℃
穩定性	6月
操作流程	包被（注：具體的包被的條件需要根據培養系統優化） 1.用0.02mol/L的鹽酸稀釋4mg/ml的膠原到50-100ug/ml。 2.溫和混勻稀釋后的溶液。 3.取適量的稀釋后的膠原加入孔內或板內。注：保證整個表面都是包被的。 4. 37℃或室溫孵育1-2小時 5. 棄掉所有溶液。 6.用培養基或者PBS漂洗包被表面。 7.包被好的孔或板2-8℃保存或者空氣中晾干（如果保持無菌）三維凝膠制備流程：用PBS等體積稀釋膠原溶液，終濃度2mg/ml。加入適量的稀釋后的膠原到孔內或板內。 37℃孵育30~60分鐘。凝膠可以2-8℃保存或者空氣中晾干（如果保持無菌）。

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